BIS-TRIS Buffer CAS 6976-37-0

Mae'n glustog biolegol effeithlon gydag ystod byffro pH effeithiol o 5.8-7.2 a gwerth pKa o 6.5 (25 gradd ). Mewn arbrofion biocemegol, mae llawer o fiomoleciwlau fel proteinau ac asidau niwclëig yn sensitif iawn i werthoedd pH, a gall hyd yn oed newidiadau bach mewn pH effeithio ar eu strwythur a'u swyddogaeth. Gall BIS-TRIS sefydlogi gwerth pH yr hydoddiant o fewn yr ystod pH hwn, gan ddarparu amgylchedd sefydlog ar gyfer adweithiau biocemegol.Yn y broses o wahanu a phuro protein, gellir cynnal cydffurfiad naturiol y protein i atal dadnatureiddio neu wlybaniaeth oherwydd newidiadau pH.

Er enghraifft, mewn technegau puro protein megis cromatograffaeth cyfnewid ïon a chromatograffaeth affinedd, mae'r defnydd oByffer BIS-TRISyn gallu sicrhau bod y rhyngweithio rhwng proteinau a chyfryngau cromatograffaeth yn digwydd o dan amodau pH sefydlog, a thrwy hynny wella effeithlonrwydd puro a phurdeb.

Mewn profion gweithgaredd ensymau, mae gweithgaredd ensymau yn aml yn dibynnu ar amgylchedd pH penodol. Gellir rheoli gwerth pH y system adwaith yn fanwl gywir i alluogi'r ensym i wneud gweithgaredd catalytig o dan amodau pH optimaidd, a thrwy hynny fesur gweithgaredd yr ensym yn gywir. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer astudio priodweddau, mecanweithiau gweithredu, a datblygu paratoadau ensymau ensymau.

Mae gan BIS{0}TRIS y gallu i gydgysylltu ag ïonau metel amrywiol a ffurfio cymhlygion sefydlog, megis Zn ² ⁺ - BIS{{2}TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS, ac ati. cofactors i gymryd rhan mewn ffurfio canolfannau gweithredol mewn proteinau. Trwy gydlynu BIS-TRIS ag ïonau metel, gellir sefydlogi adeiledd cymhlygion ïon metel protein, gan ei gwneud hi'n haws defnyddio technegau megis crisialograffi pelydr-X a chyseiniant magnetig niwclear (NMR) ar gyfer dadansoddiad adeileddol.

Er enghraifft, mae canolfannau gweithredol rhai ensymau sy'n cynnwys sinc angen ïonau sinc i gynnal eu gweithgaredd catalytig, a gall cyfadeiladau BIS-TRIS Zn ² ⁺ ddarparu amgylchedd adeileddol sefydlog ar gyfer yr ensymau hyn, sy'n helpu i ddadansoddi eu strwythurau tri dimensiwn yn gywir.

Mewn ymchwil asid niwclëig megis dilyniannu DNA, gall ïonau metel hefyd fod yn rhan o blygu a rheoleiddio swyddogaethol asidau niwclëig. Gall y cydgysylltiad rhwng BIS -TRIS ac ïonau metel reoleiddio amgylchedd lleol asidau niwclëig, gan effeithio ar y rhyngweithiadau rhwng asidau niwclëig a phroteinau, moleciwlau bach, ac ati, gan ddarparu arf pwerus ar gyfer-ymchwil manwl i strwythur a swyddogaeth asidau niwclëig.

Mae gan BIS{0}TRIS gymwysiadau pwysig mewn arbrofion electrofforesis protein. Mae SDS{2}}PAGE (electrofforesis gel polyacrylamid dodecyl sylffad sodiwm) a TUDALEN Brodorol (electrofforesis gel polyacrylamid nad yw'n dadnatureiddio) yn dechnegau electrofforesis protein cyffredin.Byffer BIS-TRISyn cael ei ddefnyddio'n aml i baratoi byffer electrofforesis i gynnal sefydlogrwydd pH yr hydoddiant yn ystod electrofforesis. Yn SDS-TUDALEN, mae proteinau'n cael eu dadnatureiddio a'u gwefru'n negyddol mewn byffer sampl sy'n cynnwys SDS a mercaptoethanol, ac yna'n cael eu gwahanu gan faint moleciwlaidd mewn gel polyacrylamid.

Gall sicrhau sefydlogrwydd gwerth pH y byffer electrofforesis, gan ganiatáu i broteinau ymfudo yn y ffordd ddisgwyliedig mewn maes trydan, a thrwy hynny wahanu proteinau o wahanol bwysau moleciwlaidd yn gywir a chanfod eu pwysau moleciwlaidd cymharol.

Yn TUDALEN Brodorol, mae proteinau yn cynnal eu cydffurfiad naturiol ar gyfer gwahaniad electrofforetig. Gall ei ddefnyddio atal dadnatureiddio protein oherwydd newidiadau pH, cadw gweithgaredd naturiol a gwybodaeth gydffurfiadol proteinau, a helpu i astudio cyflwr naturiol a rhyngweithiadau proteinau.

Mae blotio gorllewinol yn dechneg arbrofol bwysig a ddefnyddir i ganfod lefel mynegiant y proteinau targed. Defnyddir byffer propan Bis Tris yn aml fel byffer cludo protein mewn arbrofion imiwnoblotio.

Yn ystod y broses o drosglwyddo protein o gel i'r bilen, gall byffer propan Bis Tris gynnal amgylchedd pH sefydlog, gan sicrhau bod y protein yn cael ei drosglwyddo i'r bilen gyda chydffurfiad cywir a chyflwr tâl. Mae hyn yn hanfodol ar gyfer rhwymo gwrthgyrff dilynol a chanfod signal.

Os bydd proteinau'n cael eu dadnatureiddio neu'n newid cydffurfiad yn ystod y broses drosglwyddo, gall achosi i wrthgyrff fethu ag adnabod y protein targed yn gywir, a thrwy hynny effeithio ar gywirdeb canlyniadau arbrofol. Felly, mae byffer propan Bis Tris yn chwarae rhan hanfodol mewn arbrofion imiwnoblotio, gan helpu i wella sensitifrwydd a dibynadwyedd yr arbrofion.

Mae diwylliant celloedd yn dechnoleg bwysig mewn ymchwil biofeddygol, ac mae gwerth pH cyfrwng diwylliant celloedd yn cael effaith sylweddol ar dwf celloedd a metaboledd. Gellir defnyddio byffer propan BIS-TRIS ar gyfer paratoi cyfryngau meithriniad celloedd i gynnal gwerth pH sefydlog yn ystod y broses meithrin celloedd.

Mae gan wahanol fathau o gelloedd ofynion pH amrywiol, ond yn gyffredinol mae angen twf mewn amgylchedd sy'n agos at pH ffisiolegol (tua 7.2-7.4).

Gall byffer propan BIS-TRIS glustogi newidiadau pH y cyfrwng diwylliant yn ystod meithriniad celloedd, atal amrywiadau pH a achosir gan groniad cynnyrch metabolig, cyfnewid nwy, a ffactorau eraill, a darparu amgylchedd twf sefydlog i gelloedd. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer twf arferol, ymlediad, a mynegiant swyddogaethol celloedd, gan helpu i wella cyfradd llwyddiant diwylliant celloedd a dibynadwyedd canlyniadau arbrofol.

Mae electrofforesis asid niwcleig yn ddull a ddefnyddir yn gyffredin ar gyfer canfod hyd a chrynodiad asidau niwclëig targed, gan gynnwys electrofforesis DNA ac RNA. Yn addas ar gyfer arbrofion electrofforesis asid niwclëig, gall gynnal sefydlogrwydd pH y byffer electrofforesis.

Mewn electrofforesis asid niwclëig, mae moleciwlau asid niwclëig yn mudo o dan weithred maes trydan yn seiliedig ar eu maint a'u priodweddau gwefr.

Gall sicrhau sefydlogrwydd gwerth pH yr hydoddiant yn ystod electrofforesis, gan ganiatáu i foleciwlau asid niwclëig fudo yn y ffordd ddisgwyliedig, a thrwy hynny wahanu darnau asid niwclëig o wahanol hyd yn gywir a chanfod eu crynodiadau. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer ymchwil megis clonio genynnau, dadansoddi mynegiant genynnau, a dilyniannu asid niwclëig.

Gellir defnyddio BIS-TRIS hefyd i ganfod creatine kinase. Mae Creatine kinase yn ensym pwysig sy'n chwarae rhan hanfodol ym metaboledd egni cyhyrau. Mae penderfyniad ei weithgaredd yn arwyddocaol iawn ar gyfer gwneud diagnosis o glefydau cyhyrau a gwerthuso anafiadau chwaraeon. Yn yr arbrawf canfod creatine kinase, gellir cynnal sefydlogrwydd pH y system adwaith i sicrhau bod yr ensym yn arddangos gweithgaredd catalytig o dan amodau pH gorau posibl. Trwy reoli'r gwerth pH yn union, gellir gwella cywirdeb a dibynadwyedd mesuriad gweithgaredd creatine kinase, gan ddarparu cefnogaeth gref ar gyfer diagnosis ac ymchwil glinigol.

Mae BIS-TRIS hefyd yn chwarae rhan bwysig yn y gwaith o ymchwilio a chymhwyso haemoglobin. Yn ystod y broses wahanu haemoglobin, gellir cynnal ei sefydlogrwydd a'i weithgaredd i atal dadnatureiddio neu agregu oherwydd newidiadau pH. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer puro ac ymchwil strwythurol haemoglobin.

Gall BIS{0}TRIS amddiffyn haemoglobin yn effeithiol yn ystod y broses sychu rhewi. Mae rhewi sychu yn ddull a ddefnyddir yn gyffredin ar gyfer cadw cynhyrchion biolegol, ond gall proteinau gael eu niweidio yn ystod y broses rewi a sychu. Gall ddarparu amgylchedd sefydlog ar gyfer haemoglobin yn ystod y broses rewi o sychu, lleihau dadnatureiddio protein ac anactifadu, a gwella gweithgaredd a sefydlogrwydd haemoglobin ar ôl rhewi-sychu.

Mae IEF (electrofforesis ffocysu isoelectric) ac electrofforesis gel 2-D yn dechnegau cyffredin mewn ymchwil proteomeg, a ddefnyddir i wahanu a dadansoddi cymysgeddau protein cymhleth. Gellir defnyddio BIS-TRIS fel electrolyte catod ar gyfer electrofforesis gel IEF/2-D.

Yn ystod y broses IEF, mae proteinau'n mudo ac yn canolbwyntio mewn graddiant pH yn seiliedig ar eu pwynt isoelectric. Gall catolyte BIS-TRIS gynnal sefydlogrwydd pH y byffer electrofforesis, gan sicrhau bod proteinau’n gallu mudo’n gywir i’w pwynt isoelectric yn ystod y broses ffocysu isoelectric. Mewn electrofforesis gel 2-D, y defnydd oByffer BIS-TRIShefyd yn helpu i wella effaith gwahanu a chydraniad proteinau, gan ddarparu data o ansawdd uchel ar gyfer ymchwil proteomeg.