Tetramethylbenzidine CAS 54827-17-7

Ym maes diagnosteg in vitro clinigol, TMB yw'r swbstrad cromogenig craidd o assay imiwn-imiwnedd sy'n gysylltiedig ag ensymau (ELISA) a chydran swyddogaethol graidd mwyafrif helaeth y citiau imiwno-assay. Yn yr olygfa o ganfod clefydau heintus yn serolegol, mae pecynnau ELISA ar gyfer sgrinio clefydau heintus megis hepatitis BB, gwrthgorff hepatitis C, a gwrthgorff AIDS yn seiliedig ar system gromogenig TMB, gyda lliw cefndir hynod o isel a sensitifrwydd canfod uchel, wedi dod yn gynllun technegol prif ffrwd ar gyfer sgrinio gwaed ar raddfa fawr mewn gorsafoedd gwaed domestig.

Mae data cymhwysiad gorsafoedd gwaed domestig yn dangos y gall y terfyn canfod lleiaf o antigen arwyneb hepatitis BB gyrraedd 0.1IU/mL gyda'r pecyn sgrinio gwaed yn defnyddio TMB fel y swbstrad cromogenig.

O'i gymharu â'r system gromogenig OPD draddodiadol, mae'r gyfradd diagnosis a fethwyd negyddol ffug yn cael ei ostwng 90%, gan rwystro'n llwyr y risg o drosglwyddo clefydau heintus sy'n gysylltiedig â thrallwysiad o'r ffynhonnell. Mewn sgrinio cleifion allanol arferol ar gyfer clefydau heintus mewn ysbytai trydyddol, mae pecyn ELISA system lliwimetrig TMB yn rheoli'r gwahaniaeth rhwng swp o ganlyniadau canfod o fewn 5%, yn dyblu'r cyflymder canfod o'i gymharu â dulliau traddodiadol, a gall gwblhau profion trwybwn uchel o filoedd o samplau y dydd.

Cwrdd yn berffaith ag anghenion sgrinio cynnar o glefydau heintus mewn-poblogaethau ar raddfa fawr. Wrth ganfod hormonau a marcwyr tiwmor yn glinigol, amlygir ymhellach fantais sensitifrwydd uchel system lliwimetrig TMB. Wrth ganfod dangosyddion hormonau swyddogaeth thyroid megis TSH, T3, T4, ac ati, mae ystod llinol ddeinamig datblygiad lliw TMB dair gwaith yn ehangach nag adweithyddion datblygu lliw traddodiadol, a all gwmpasu'n gywir yr ystod crynodiad lawn o unigolion iach i gleifion hyperthyroidiaeth a hypothyroidiaeth, gan osgoi larymau ffug a achosir gan effeithiau bachyn mewn samplau crynodiad uchel.

Wrth ganfod marcwyr tiwmor yn glinigol, gall y pecyn ELISA sydd wedi'i seilio ar TMB ganfod marcwyr tiwmor fel CEA ac AFP yn gywir gyda chrynodiad o ychydig ng/mL mewn serwm yn unig, gan ddarparu canlyniadau meintiol dibynadwy ar gyfer sgrinio cynnar a monitro canser eto ar ôl llawdriniaeth.

Mae data ystadegol o adran patholeg ysbyty trydyddol yn Tsieina yn dangos bod cyfradd canfod tiwmorau gastroberfeddol cynnar gan ddefnyddio cynllun canfod cyfuniad marciwr tiwmor lliwimetrig TMB 25% yn uwch na dulliau traddodiadol. Yn y senario diagnosis ategol o ganfod antigen COVID-19 yn gyflym, TMB, fel elfen graidd datblygiad lliw ensymatig heblaw dull aur colloidal.

Fe'i cymhwysir yn y-system ganfod ELISA trwybwn uchel ar gyfer antigen COVID-19. Mae'r sensitifrwydd canfod yn un gorchymyn maint yn uwch na dull aur colloidal traddodiadol, a all gyflawni canfod cadarnhaol yn y cyfnod o lwyth firaol isel, gan leihau'n fawr y gyfradd diagnosis a fethwyd o bobl heintiedig gynnar. Yn y system ategol o immunoassay chemiluminescence llawn awtomataidd, gall TMB, fel swbstrad gwell ar gyfer cemiluminescence uniongyrchol marchruddygl peroxidase (HRP), wella'n sylweddol ddwysedd a sefydlogrwydd y signal ymoleuedd, cynyddu'r signal i{8}}cymhareb sŵn canfod cemiluminescence 4 gwaith o 3%, a chanfod y canlyniad yn cwrdd â gwerth llawn 4 gwaith o 3%, a rheoli'r canlyniad yn cwrdd â gwerth llawn o fewn 4 gwaith o 3. gofynion canfod manylder uchel ar gyfer offer imiwno-brofi cwbl awtomataidd.

Ym maes ymchwil fiolegol,tetramethylbenzidineyw'r swbstrad cromogenig a ffafrir ar gyfer gwrthgyrff eilaidd wedi'u labelu gan HRP mewn arbrofion blot Gorllewinol ac mae'n un o'r adweithyddion cromogenig a ddefnyddir amlaf mewn labordai bioleg moleciwlaidd. Mewn arbrofion Western Blot traddodiadol, gall defnyddio system lliwimetrig gwell cemiluminescence TMB ganfod proteinau targed mor isel â lefel pg.

O'i gymharu â dull lliwimetrig DAB traddodiadol, mae'r sensitifrwydd canfod yn cael ei gynyddu gan ddau orchymyn maint, a gall nodi'n hawdd y newidiadau mynegiant o broteinau llwybr signalau digonedd isel a ffactorau trawsgrifio mewn celloedd. Mae data arbrofol cymharol o labordy bioleg prifysgol ddomestig yn dangos, gan ddefnyddio datrysiad goleuo sensitifrwydd uchel wedi'i optimeiddio TMB, bod amser datblygu Western Blot wedi'i fyrhau o'r 30 munud traddodiadol i lai na 10 eiliad, gyda bandiau cefndir glân a dim amhureddau. Gellir gwahaniaethu'n glir dau fand protein tebyg gyda gwahaniaeth pwysau moleciwlaidd o 1kDa yn unig, gan wella dibynadwyedd arbrofion imiwnoblotio protein yn fawr.

Yn y senarios arbrofol o imiwn-histocemeg ac imiwn-histocemeg, gall y system staenio TMB well gynhyrchu cynhyrchion anhydawdd glas sefydlog, gan leoli lleoliad mynegiant proteinau targed yn gywir mewn sleisys meinwe a sleidiau celloedd. O'i gymharu â staenio melyn brown-frown DAB traddodiadol, mae'r cynhyrchion staenio glas TMB yn wahaniaeth lliw meddal gyda'r niwclysau porffor glas wedi'u staenio â hematoxylin, heb y trylediad ymyl cyffredin a phroblemau staenio cefndir heb fod yn benodol i staenio DAB. Yn yr arbrofion o leoleiddio protein niwrodrosglwyddydd mewn meinwe niwral a dehongliad mynegiant protein PD-L1 mewn meinwe tiwmor.

Mae cydnabod canlyniadau staenio TMB yn sylweddol well na dulliau staenio traddodiadol, gan helpu ymchwilwyr i arsylwi'n fwy cywir ar forffoleg lleoleiddio isgellog protein.

Yn y senario ymchwil sylfaenol o ddadansoddi gweithgaredd ensymau, mae TMB yn swbstrad penodol ar gyfer pennu gweithgaredd olrhain peroxidase. Yn seiliedig ar sbectrophotometreg lliwimetrig ocsidiad TMB, gellir canfod gweithgaredd ensymau HRP gyda chrynodiad mor isel ag 1ng/mL yn y sampl yn gywir. Mae'n ddull arbrofol clasurol ar gyfer astudio peroxidase planhigion a gweithgaredd ensymau gwrthocsidiol microbaidd. Yn yr ymchwil flaengar i enzymoleg moleciwl sengl, gall moleciwlau TMB ansymudol gynhyrchu gwaddod lliw lleoledig o dan gatalysis un moleciwl ensym HRP.

Gellir gweld dosbarthiad gofodol a chineteg catalytig moleciwl ensym sengl yn uniongyrchol trwy ficrosgop optegol, gan ddarparu dull arsylwi greddfol ar gyfer ymchwil sylfaenol i ensymoleg moleciwl sengl. Yn y senario canfod o hybrideiddio asid niwclëig, mae HRP wedi'i labelu ar y stiliwr asid niwclëig ac mae'r dilyniant asid niwclëig targed yn y sampl yn cael ei ganfod yn feintiol gan ddwysedd lliw TMB. Heb yr angen am offer canfod fflworoleuedd cymhleth, gellir cwblhau canfod asid niwclëig ansoddol a meintiol cost isel. Fe'i defnyddiwyd yn helaeth mewn arbrofion teipio genynnau a sgrinio cydrannau a addaswyd yn enetig mewn labordai ymchwil gwyddonol ar lawr gwlad.

Ym maes monitro amgylcheddol,tetramethylbenzidineyn cael ei ddefnyddio'n helaeth fel adweithydd lliwimetrig ocsideiddio hynod sensitif ar gyfer canfod symiau hybrin o hydrogen perocsid ac ïonau metel trwm mewn dŵr yn gyflym. Yn y senario o brofi diogelwch dŵr yfed, gall system canfod lliwimetrig efelychiad peroxidase TMB ganfod diheintydd hydrogen perocsid gweddilliol yn gyflym mewn dŵr yfed mor isel â 0.01mg / L, ymhell islaw gofynion terfyn y safonau hylendid dŵr yfed cenedlaethol.

Nid oes angen offerynnau mawr ar y broses ganfod, a gellir cwblhau dyfarniad lled feintiol trwy arsylwi dyfnder glas yr ateb gyda'r llygad noeth, sy'n addas iawn ar gyfer monitro ansawdd dŵr brys yn y maes. Yn y senario canfod ïonau metel trwm fel plwm a mercwri mewn cyrff dŵr, gall peroxidase efelychiad aur nano swyddogaethol ymateb yn benodol i ïonau metel trwm. Trwy newid dwyster lliw TMB, gellir canfod delweddu detholus uchel o ïonau metel trwm, gyda therfyn canfod hyd at 1nM a chost canfod o ddim ond un y cant o sbectrosgopeg amsugno atomig traddodiadol.

Mae wedi dangos gwerth cymhwysiad hynod o uchel mewn sgrinio diogelwch dŵr yfed gwledig a monitro cyflym o safleoedd gollwng dŵr gwastraff diwydiannol.

Ym maes profi diogelwch bwyd, TMB yw'r gydran datblygu lliw craidd o wahanol stribedi prawf canfod cyflym. Yn y senario o ataliad ensymau canfod gweddillion plaladdwyr mewn bwyd, mae plaladdwyr organoffosfforws a carbamate yn atal gweithgaredd acetylcholinesterase. Trwy gyplu newid lliw TMB wedi'i gataleiddio peroxidase, gellir cwblhau sgrinio gweddillion plaladdwyr mewn llysiau ar{-yn gyflym o fewn 10 munud.

Mae sensitifrwydd canfod yn bodloni gofynion terfyn safonau diogelwch bwyd cenedlaethol a dyma'r dull canfod cyflym a ddefnyddir amlaf ar gyfer gweddillion plaladdwyr mewn marchnadoedd amaethyddol domestig ac adrannau rheoleiddio ar lawr gwlad. Yn y canfod imiwnochromatograffig aur colloidal o lygryddion moleciwl bach fel clenbuterol a melamin a ychwanegwyd yn anghyfreithlon mewn bwyd, gall yr ensym catalyzed gwell technoleg colorimetrig yn seiliedig ar TMB gynyddu sensitifrwydd canfod stribedi prawf aur colloidal traddodiadol fwy na 10 gwaith, gan ganfod yn gywir crynodiad isel ychwanegion anghyfreithlon a lleihau'n fawr y tebygolrwydd o ganfod aflwyddiannus ffug.

Yn y senario canfod cyflym o halogiad microbaidd mewn bwyd, gall y defnydd o hydrogen perocsid a gynhyrchir yn ystod metaboledd microbaidd, ynghyd ag adwaith lliw TMB, gwblhau sgrinio lled feintiol yn gyflym o gyfanswm nifer y bacteria mewn bwyd o fewn 2 hours.Compared â'r dull diwylliant plât traddodiadol 48 awr, mae'r amser canfod yn cael ei fyrhau'n fawr, sy'n addas iawn ar gyfer rheoli ansawdd bwyd yn gyflym o fentrau gweithgynhyrchu llinellau cynhyrchu bwyd. Wrth ganfod afflatocsin B1 yn gyflym mewn bwydydd grawn ac olew, mae gan system ganfod ELISA TMB derfyn canfod lleiafswm o 0.1 μ g/kg, sy'n cwrdd yn llawn â gofynion terfyn llym afflatocsin mewn bwyd cenedlaethol. Mae'r gost canfod yn llawer is na'r hyn a ddefnyddir ar gyfer dulliau canfod sbectrometreg màs gydag offer mawr, sy'n golygu ei fod yn addas ar gyfer arolygon diogelwch bwyd grawn ac olew ar raddfa fawr.