IPTG, CAS 367-93-1, strwythur cemegol sy'n cynnwys isopropyl - Mae'n cynnwys grwpiau D-thiogalactosid a ffosffad. Yn eu plith, - mae D-thiogalactosid yn analog o galactos, lle mae'r atom sylffwr yn disodli'r atom ocsigen. Mae'r strwythur glycosid arbennig hwn yn caniatáu i IPTG glymu i DNA a chymell mynegiant genynnau. Mae gan IPTG hydoddedd isel mewn dŵr, ond gall hydoddi'n dda mewn byffer halwynog ffisiolegol a ffosffad. Mae'n asidig gyda gwerth pKa o 4.5, sy'n gysylltiedig â'r grŵp ffosffad yn ei strwythur moleciwlaidd. Nid yw'n hawdd crisialu mewn dŵr pur, ond gall ffurfio crisialau mewn datrysiadau crynodiad uchel neu pan ychwanegir cyfansoddion eraill. Oherwydd ei allu i gymell mynegiant protein bacteriol, mae IPTG yn sensitif i rai micro-organebau. Er enghraifft, gall rhai bacteria roi'r gorau i dyfu neu farw ar ôl dod i gysylltiad ag IPTG.
(Cyswllt Cynnyrch 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html ）
(Cyswllt Cynnyrch 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html ）
Mae synthesis ensymatig IPTG yn ddull sy'n defnyddio ensymau i gataleiddio adwaith galactos a wridin triffosffad i gynhyrchu grwpiau isopropyl - - Dull ar gyfer D-thiogalactosid. Dyma gamau manwl a hafaliadau cemegol y dull hwn:
1. Gwaith paratoi:
Paratowch yr adweithyddion a'r offer angenrheidiol, gan gynnwys galactos, wridin triffosffad, ensymau, byffer, cynwysyddion adwaith, rheolyddion tymheredd, ac ati.
Ychwanegwch galactos ac wridin triffosffad mewn cyfran benodol i'r llestr adwaith.
Ychwanegwch swm priodol o ensym a byffer i gynnal sefydlogrwydd pH y system adwaith.
Rhowch y cynhwysydd adwaith yn y rheolydd tymheredd a gosodwch y tymheredd adwaith priodol.
2. Proses ymateb
2.1 Cymysgwch y system adwaith yn gyfartal ar dymheredd priodol.
2.2 Cynnal tymheredd a sefydlogrwydd pH y system adwaith a pharhau i droi.
2.3 Samplu a phrofi isopropyl yn rheolaidd- - Cynhyrchu D-thiogalactosid.
2.4 Addaswch y dos ensym a'r amser adweithio yn seiliedig ar ganlyniadau'r prawf i gael y grŵp isopropyl gorau- - o gynhyrchu D-thiogalactosid.
3. hafaliad cemegol
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + CDU → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Yn eu plith, mae ATP yn cynrychioli adenosine triphosphate, CDU yn cynrychioli diphosphate uridine, ac mae Pi yn cynrychioli ffosfforws anorganig. Mae'r hafaliad cemegol hwn yn cynrychioli ffurfio grwpiau isopropyl o galactos a wridin triffosffad o dan weithred ensymau - - D-thiogalactosid ac ADP, yn ogystal â Pi.
4. Gwahanu a phuro
Ar ôl cwblhau'r adwaith, caiff hydoddiant yr adwaith ei hidlo neu ei allgyrchu i gael gwared ar galactos heb adweithio, wridin triffosffad, ac amhureddau eraill.
Defnyddio technegau gwahanu a phuro priodol, megis cyfnewid ïon, cromatograffaeth, ac ati, i buro isopropyl- - D-thiogalactosid ymhellach.
Cynnal profion ansawdd, megis cromatograffaeth hylif perfformiad uchel, sbectrometreg màs, ac ati, i sicrhau bod ansawdd y cynnyrch yn bodloni'r gofynion.
5. Crynodeb
Mae gan ddull synthesis ensymatig IPTG ddetholusrwydd, cynnyrch a phurdeb uchel, yn ogystal â chyfeillgarwch amgylcheddol a diogelwch uchel. Yn y dull hwn, mae math, crynodiad, gwerth pH, tymheredd ac amodau eraill yr ensym yn cael effaith sylweddol ar ganlyniadau'r adwaith, ac mae angen rheolaeth ac addasiad manwl gywir. Yn ogystal, mae'r camau gwahanu a phuro hefyd yn hanfodol i sicrhau ansawdd a phurdeb y cynnyrch. Mewn gweithrediad ymarferol, dylid gwneud addasiadau ac optimeiddio yn ôl amgylchiadau penodol i gael y grŵp isopropyl gorau- - Cynhyrchu ac ansawdd D-thiogalactosid.
Mae dull adwaith aml-gydran IPTG yn adwaith sy'n defnyddio cyfranogiad cydrannau lluosog i syntheseiddio isopropyl- - Dull ar gyfer D-thiogalactoside. Dyma gamau manwl a hafaliadau cemegol y dull hwn:
1. Gwaith paratoi
Paratowch yr adweithyddion a'r offer angenrheidiol, gan gynnwys galactos, wridin triphosphate, adenosine triphosphate, sodiwm thiosylffad, ensymau, byffer, cynwysyddion adwaith, rheolwyr tymheredd, ac ati.
Ychwanegwch galactos, wridin triffosffad, adenosine triphosphate, a sodiwm thiosylffad mewn cyfran benodol i'r llestr adwaith.
Ychwanegwch swm priodol o ensym a byffer i gynnal sefydlogrwydd pH y system adwaith.
Rhowch y cynhwysydd adwaith yn y rheolydd tymheredd a gosodwch y tymheredd adwaith priodol.
2. Proses ymateb
2.1 Cymysgwch y system adwaith yn gyfartal ar dymheredd priodol.
2.2 Cynnal tymheredd a sefydlogrwydd pH y system adwaith a pharhau i droi.
Yn ystod y broses adwaith, dylid talu sylw i arsylwi cynnydd yr adwaith, addasu faint o ensym ac amser adwaith yn amserol i gael y grŵp isopropyl gorau - - cynhyrchu D-thiogalactosid.
3. hafaliad cemegol
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Yn eu plith, mae ATP yn cynrychioli adenosine triphosphate, mae CDU yn cynrychioli uridine diphosphate, ADP yn cynrychioli adenosine diphosphate, ac mae Pi yn cynrychioli ffosfforws anorganig. Mae'r hafaliad cemegol hwn yn cynrychioli ffurfio grwpiau isopropyl o galactos, wridin triffosffad, ac adenosine triffosffad o dan weithred ensymau - - D-thiogalactosid a Pi.
4. Gwahanu a phuro
Ar ôl i'r adwaith gael ei gwblhau, caiff hydoddiant yr adwaith ei hidlo neu ei allgyrchu i gael gwared ar galactos heb adweithio, triffosffad wridin, adenosine triphosphate, ac amhureddau eraill.
Defnyddio technegau gwahanu a phuro priodol, megis cyfnewid ïon, cromatograffaeth, ac ati, i buro isopropyl- - D-thiogalactosid ymhellach.
Cynnal profion ansawdd, megis cromatograffaeth hylif perfformiad uchel, sbectrometreg màs, ac ati, i sicrhau bod ansawdd y cynnyrch yn bodloni'r gofynion.
5. Crynodeb
Mae dull adwaith aml-gydran IPTG yn defnyddio manteision cydrannau lluosog sy'n cymryd rhan yn yr adwaith gyda'i gilydd, gyda detholiad uchel, cynnyrch a phurdeb. Yn y dull hwn, yn ychwanegol at y prif ddeunyddiau crai megis galactos, uridine triphosphate, ac ensymau, mae cydrannau ategol megis adenosine triphosphate a sodiwm thiosylffad hefyd yn cael eu hychwanegu i hyrwyddo'r adwaith a gwella ansawdd y cynnyrch. Yn ogystal, mae'r camau gwahanu a phuro hefyd yn hanfodol i sicrhau ansawdd a phurdeb y cynnyrch. Mewn gweithrediad ymarferol, dylid gwneud addasiadau ac optimeiddio yn ôl amgylchiadau penodol i gael y grŵp isopropyl gorau- - Cynhyrchu ac ansawdd D-thiogalactosid. Ar yr un pryd, dylid rhoi sylw i reoli amodau adwaith megis tymheredd, gwerth pH, a dos ensymau i gyflawni'r effaith adwaith gorau.