Powdwr Liraglutide CAS 204656-20-2

Powdr liraglutide, Fformiwla Foleciwlaidd C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, Pwysau Moleciwlaidd 1209.40. Mae'n glwcagon dynol acylated wedi'i syntheseiddio artiffisial fel analog peptid-1 (GLP-1) gyda thebygrwydd dilyniant dros 97% o'i gymharu â GLP-1 naturiol. Gellir ei hydoddi mewn dŵr, ethanol, a propylen glycol. Mae 34ain safle lysin y moleciwl GLP-1 naturiol yn cael ei ddisodli gan arginine, sydd nid yn unig yn cadw ac yn ymestyn yr amser rhwymo rhwng cynhyrchion acylation a phroteinau, ond hefyd yn goresgyn anfantais diraddio GLP yn hawdd yn sylweddol. O dan amodau storio arferol, mae'n arddangos sefydlogrwydd da, a gall ei doddiant dyfrllyd gynnal sefydlogrwydd ffisegol a chemegol am o leiaf 2 flynedd.

Gwenwyndra genetig: canlyniadau'r prawf Ames ar gyferPowdr liraglutide, roedd y prawf aberration cromosomaidd ar gyfer lymffocytau gwaed ymylol dynol, a phrawf microniwclews llygod mawr i gyd yn negyddol.

Gwenwyndra atgenhedlu:

1. Chwistrellwyd llygod mawr gwrywaidd yn isgroenol gyda 0.1, 0.25, a 1.0mg/kg/d o liraglutide 4 wythnos cyn paru ac yn ystod paru. Ar ddogn o 1.0mg/kg/d, ni effeithiwyd yn uniongyrchol ar ffrwythlondeb anifeiliaid gwrywaidd. Yn ôl cyfrifiadau plasma AUC, roedd yr amlygiad systemig a gynhyrchwyd gan y dos hwn oddeutu 11 gwaith yn fwy na amlygiad dynol ar y dos dynol a argymhellir ar y mwyaf (MRHD). Arweiniodd chwistrelliad isgroenol o 1.0mg/kg i lygod mawr benywaidd at fwy o farwolaeth embryonig gynnar, magu pwysau gweladwy, a llai o gymeriant bwyd.

2. O bythefnos cyn paru i'r 17eg diwrnod o feichiogrwydd mewn llygod mawr benywaidd, gweinyddwyd pigiadau isgroenol o 0.1, 0.25, a 1.0 mg/kg/d o liraglutide. Yn ôl cyfrifiadau plasma AUC, roedd yr amlygiad systemig a gynhyrchwyd gan y tri dos hyn oddeutu 0.8, 3, ac 11 gwaith yn fwy na amlygiad dynol o dan MRHD, yn y drefn honno. Yn y grŵp dos 1mg/kg/d, bu cynnydd bach yn nifer y marwolaethau embryonig cynnar. Ar bob dos, arsylwyd annormaleddau'r ffetws, amrywiadau arennol a fasgwlaidd, ossification afreolaidd y benglog, a chyflwr llwyr o ossification gormodol. Ar ddogn o 1.0mg/kg/d, gwelwyd yr afu brych a throelli asennau bach. Nifer yr achosion o gamffurfiadau ffetws sy'n fwy na'r un cyfnod a rheolaeth hanesyddol yw: camffurfiadau oropharyngeal a/neu stenosis yn y gwddf sy'n agor ar ddogn o 01mg/kg/d, a diffygion bogail ar ddos ​​o 0.1 a 0.25mg/kg/d.

Ar y 6ed i'r 18fed diwrnod o feichiogrwydd, chwistrellwyd cwningod yn isgroenol â liraglutide mewn crynodiadau o 0.01, 0.025, a 0.05mg/kg/d. Yn ôl cyfrifiadau plasma AUC, roedd amlygiad systemig cwningod beichiog yn is nag amlygiad bodau dynol yn ystod MRHD. Ar bob dos, gostyngodd pwysau'r ffetws a chynyddodd nifer yr achosion o annormaleddau ffetws difrifol mewn dull dos-ddibynnol. Mewn dosau o 0.01mg/kg/d (esgyrn arennau, ysgwydd a dueg), yn fwy na neu'n hafal i 0.01mg/kg/d (llygaid a forelimbs), 0.025mg/kg/d (ymennydd, cynffon a fertebra), pibellau gwaed mawr/kg/kg, 0.0 neu ornest umbilig, umbilical/kg), a 0.05mg/kg/d (asgwrn parietal a phibellau gwaed mawr), roedd nifer yr achosion o gamffurfiadau yn uwch na rheolaethau cyfoes a hanesyddol. Mae ossification afreolaidd a/neu annormaleddau ysgerbydol i'w cael yn y benglog a'r coler, fertebra ac asennau, sternwm, pelfis, coccyx, ac esgyrn ysgwydd a dueg; Mae yna hefyd ychydig o amrywiad ysgerbydol sy'n ddibynnol ar ddos ​​i'w weld. Mae annormaleddau visceral i'w cael mewn pibellau gwaed, ysgyfaint, afu ac esophagus. Dangosodd pob grŵp triniaeth llabedau dwbl neu bifurcations o'r goden fustl, ond ni welwyd unrhyw sefyllfa debyg yn y grŵp rheoli.

4. Yn ystod y cyfnod o ddiwrnod 6 o feichiogrwydd i ddiddyfnu neu derfynu llaetha ar ddiwrnod 24, chwistrellwyd llygod mawr benywaidd yn isgroenol gyda 0.1, 0.25, a 1.0 mg/kg/d o liraglutide. Yn ôl cyfrifiadau plasma AUC, roedd amlygiad systemig oddeutu 0.8, 3, ac 11 gwaith yn fwy na amlygiad dynol yn ystod MRHD. Cafodd cyfnod dosbarthu'r mwyafrif o anifeiliaid yn y grŵp triniaeth ei ohirio ychydig. Roedd pwysau cyfartalog babanod newydd -anedig yn y grŵp triniaeth yn is na'r pwysau yn y grŵp rheoli. Roedd llygod mawr benywaidd yn y grŵp dos 1.0mg/kg/d yn arddangos colli gwaed ac ymddygiad cyffro wrth ei ddanfon. Roedd pwysau corff cyfartalog llygod mawr epil F2 yn y grŵp triniaeth o'i enedigaeth i'r 14eg diwrnod ar ôl genedigaeth yn is na phwysau'r grŵp rheoli, ond ni chyrhaeddodd y gwahaniaethau rhwng y grwpiau arwyddocâd ystadegol.

Powdr liraglutideyn glwcagon dynol acylated wedi'i syntheseiddio artiffisial fel analog peptid-1 (GLP-1) gyda thebygrwydd dilyniant dros 97% o'i gymharu â GLP-1 naturiol. Mae strwythur moleciwlaidd liraglutide yn cynnwys y prif nodweddion canlynol: mae 34ain safle lysin y moleciwl GLP-1 naturiol yn cael ei ddisodli gan arginine, sydd nid yn unig yn cadw ac yn ymestyn yr amser rhwymo rhwng cynhyrchion acylation a phroteinau, ond hefyd yn goresgyn anfanteision dirywiad hawdd GLP yn sylweddol; Ychwanegwyd cadwyn ochr asid brasterog ychwanegol at y 26ain lysin, sy'n helpu i ymestyn hanner oes cynhyrchion acylation yn vivo. Mae'r newidiadau moleciwlaidd unigryw hyn wedi gwneud i delilaglutide ddangos effeithiau rhagorol mewn triniaeth glinigol, yn enwedig mewn diabetes a cholli pwysau.

Mae'r dulliau cemegol ar gyfer syntheseiddio liraglutide yn cynnwys y camau canlynol yn bennaf:

1. Synthesis Darn

Yn gyntaf, rhannwch y liraglutide cyfan yn sawl segment, y gellir ei rannu'n gyffredinol yn bum segment: 1af i 4ydd asid amino, 5ed i 10fed asid amino, 11eg i 16eg asid amino, 17eg i 24ain asid amino, a 25ain i 31ain asid amino. Mae pob darn yn cael ei syntheseiddio ar wahân, a all leihau anhawster a chost synthesis peptid a gwella effeithlonrwydd synthesis.

Ar gyfer synthesis pob darn, defnyddir synthesis cyfnod solet neu ddulliau synthesis cyfnod hylif yn gyffredinol. Mae'r dull synthesis cyfnod solet yn cynnwys cysylltu'r grwpiau carboxyl o asidau amino â'r resin, yna ychwanegu'r asidau amino i'r resin yn eu trefn yn olynol, ac o'r diwedd torri'r peptidau o'r resin i ffwrdd. Mae'r dull synthesis cyfnod hylif yn cynnwys toddi'r holl asidau amino mewn toddydd organig ac yna eu cyddwyso yn eu trefn i ffurfio darnau peptid.

2. Adwaith cyplu

Perfformio adwaith cyplu ar y 5 darn peptid a syntheseiddiwyd yng Ngham 1 i ffurfio liraglutide cyflawn. Gellir cynnal yr adwaith cyplu gan ddefnyddio asiantau cyplu cemegol neu fiolegol, a gellir dewis y dull penodol yn unol ag anghenion gwirioneddol.

Yn yr adwaith cyplu, mae angen cysylltu grŵp amino pob darn â grŵp carboxyl y darn nesaf. I gyflawni hyn, fel rheol mae angen defnyddio asiantau anwedd fel DIC neu BOP. Gall yr asiantau cyddwysiad hyn hyrwyddo'r adwaith rhwng grwpiau amino a charboxyl, gan ffurfio bondiau peptid. Yn yr adwaith cyplu, dylid rhoi sylw hefyd i reoli'r amodau adweithio, megis tymheredd, gwerth pH, ​​ac amser ymateb, er mwyn sicrhau cynnydd llyfn yr adwaith.

3. Puro ac adnabod

Mae angen puro'r liraglutide syntheseiddiedig a'i nodi i sicrhau purdeb ac ansawdd y cynnyrch. Mae puro fel arfer yn cael ei wneud gan ddefnyddio dulliau fel cromatograffeg hylif perfformiad uchel (HPLC) neu electrofforesis, ac yna ei adnabod gan ddefnyddio sbectrometreg màs, cyseiniant magnetig niwclear, a dulliau eraill. Trwy'r dulliau hyn, gellir sicrhau bod pwysau moleciwlaidd a dilyniant y cynnyrch syntheseiddiedig yn gyson â'r disgwyliadau, ac nid oes unrhyw amhureddau na gweddillion sgil-gynnyrch.

4. Addasiadau Eraill

Yn ychwanegol at y camau uchod, weithiau mae angen addasiadau eraill, megis ychwanegu neu dynnu grwpiau amddiffynnol. Mae'r camau hyn hefyd yn hanfodol oherwydd gallant amddiffyn y grwpiau gweithredol mewn peptidau rhag cael eu dinistrio neu mae adweithiau ochr yn digwydd, gan wella ansawdd a chynnyrch syntheseiddiedigPowdr liraglutide.

Yr uchod yw'r prif ddulliau cemegol ar gyfer syntheseiddio liraglutide, ond wrth gwrs, mae angen nodi rhai manylion a thechnegau wrth weithredu'n ymarferol. Er enghraifft, gall dewis y system doddydd briodol, rheoli tymheredd a pH, a defnyddio catalyddion priodol i gyd effeithio ar effeithlonrwydd synthesis ac ansawdd y cynnyrch. Felly, mewn gweithrediad ymarferol, mae angen gwneud addasiadau ac optimeiddiadau yn unol ag amgylchiadau penodol.

Mae liraglutide (agonydd derbynnydd GLP-1 hir-weithredol) yn chwarae rhan sylweddol wrth drin diabetes. Er mwyn sicrhau ei reolaeth ansawdd, mae angen sefydlu dulliau dadansoddol gwyddonol a thrylwyr, a chynnal dilysiad systematig i sicrhau dibynadwyedd y dulliau hyn. Gwneir y dadansoddiad canlynol o dair agwedd: eitemau dilysu, dulliau dilysu, a phwyntiau rheoli allweddol.

Eitemau gwirio craidd a gofynion technegol

Benodoldeb

Amcan: I brofi y gall y dull wahaniaethu rhwng liraglutide oddi wrth amhureddau, cynhyrchion diraddio ac ysgarthion.

Strategaeth Weithredu:

Cromatograffeg: Defnyddiwch HPLC-UV neu UPLC-MS. Trwy brofion diraddio gorfodol (megis tymheredd uchel, amlygiad golau, hydrolysis sylfaen asid), cynhyrchu cynhyrchion diraddio a gwirio gradd gwahanu'r brif brig a'r brig amhuredd (sy'n fwy na neu'n hafal i 1.5). Er enghraifft, wrth astudio model APOE-/- llygoden, ar ôl i liraglutide gael ei ocsidio, mae angen cadarnhau'r cynhyrchion diraddio (fel ychwanegiadau asid fformig) trwy ddadansoddiad cromatograffig i sicrhau effaith gwahanu'r cynhyrchion diraddio o'r prif uchafbwynt.

Sbectrosgopeg: Defnyddiwch synhwyrydd PDA i gymharu sbectra UV y prif gopa ac amhureddau, a chadarnhau purdeb y copaon.

Rheolaeth wag: Gwiriwch absenoldeb signalau positif ffug gan ddefnyddio samplau heb liraglutide (fel datrysiadau excipient).

 

Nghywirdeb

Amcan: Er mwyn sicrhau bod y canlyniadau mesuredig yn agos at y gwir werth a bod y gyfradd adfer yn cael ei rheoli o fewn 98% - 102%.

Strategaeth Weithredu:

Prawf adfer ychwanegiad safonol: Ychwanegwch swm hysbys o sylwedd cyfeirio at sampl gyda chynnwys liraglutide hysbys a mesur y gyfradd adfer. Er enghraifft, wrth ddadansoddi'r fformiwleiddiad, ychwanegwch 0.5 mg/mL, 1.0 mg/mL, a 1.5 mg/ml o liraglutide i'r toddiant excipient gwag, ailadroddwch bob crynodiad 3 gwaith, a chyfrifwch y gyfradd adfer ar gyfartaledd.

Dull cymharu: Cymharwch â dulliau clasurol (megis titradiad) neu ddulliau wedi'u gwirio (megis dulliau ffarmacopoeia), a dylai'r gwyriad canlyniad fod yn llai na neu'n hafal i 2%.

 

Manwl gywirdeb

Amcan: Gwerthuso graddfa agosrwydd y canlyniadau mesur dro ar ôl tro, gyda RSD yn llai na neu'n hafal i 2%.

Strategaeth Weithredu:

Ailadroddadwyedd: Cynnal 6 mesuriad olynol o'r un sampl gan yr un dadansoddwr, yr un offeryn, a'r un swp o samplau, a chyfrifwch yr RSD.

Precision Canolradd: Cyfrifwch yr RSD trwy bennu'r un swp o samplau gan wahanol ddadansoddwyr, gwahanol offerynnau, a gwahanol ddyddiadau. Er enghraifft, wrth bennu cynnwys liraglutide, dylai'r RSD ailadroddadwyedd fod yn llai na neu'n hafal i 1.5%, a dylai'r RSD manwl gywirdeb canolradd fod yn llai na neu'n hafal i 2.0%.

Atgynyrchioldeb: Gwirio cydweithredol gan labordai lluosog (megis dulliau safonol ffarmacopoeia), dylai RSD gydymffurfio â'r egwyddorion canllaw.

 

Terfyn canfod a therfyn meintioli

Amcan: I bennu'r crynodiad lleiaf y gall y dull ei ganfod a meintioli liraglutide.

Strategaeth Weithredu:

Dull cymhareb signal-i-sŵn: Pennu LOD gyda chymhareb signal-i-sŵn 3: 1, a phennu LOQ gyda chymhareb signal-i-sŵn 10: 1. Er enghraifft, yn y dull HPLC-UV, gall LOD liraglutide fod mor isel â 0.01 ug/mL, ac mae'r LOQ yn 0.05 ug/ml.

Dull Cromlin Safonol: Cyfrifwch LOD a LOQ gan ddefnyddio signalau ymateb sylweddau safonol crynodiad isel (megis 0.1 ug/ml - 1 ug/ml).

 

Liniaroldeb

Amcan: I brofi bod y signal ymateb yn gymesur â'r crynodiad, gyda R² yn fwy na neu'n hafal i 0.999.

Strategaeth Weithredu:

Prawf Crynodiad Graddiant: Paratowch raddiannau crynodiad 5-7 (fel 0.1 mg/ml - 2.0 mg/ml) o doddiannau safonol, mesurwch yr ardal brig neu'r gwerth ymateb, a lluniwch y gromlin safonol.

Dadansoddiad gweddilliol: Gwiriwch a yw'r gweddillion yn cael eu dosbarthu ar hap ac nad oes gwyriad systematig.

 

Hystod

Amcan: I bennu ystod crynodiad cymwys y dull, fel arfer 120% o'r LOQ i derfyn uchaf llinoledd.

Strategaeth Weithredu:

Penderfyniad Cynnwys: Mae'r ystod wedi'i gosod ar 80% - 120% o'r swm wedi'i labelu. Er enghraifft, dylai ystod pennu cynnwys llunio liraglutide fod yn 0.4 mg/ml - 1.2 mg/ml. Rheoli amhuredd: Yn ôl canllaw ICH Q3D, gosodwch ystod terfyn amhureddau (ee, amhuredd sengl yn llai na neu'n hafal i 0.5%, cyfanswm amhuredd llai na neu'n hafal i 2.0%).

Dogfennau dilysu a rheoli data

01

Cynllun ac Adroddiad Dilysu

Diffinio'n glir yr eitemau dilysu, dulliau, safonau derbyn, a gweithdrefnau trin annormal. Er enghraifft, os yw'r RSD manwl yn fwy na'r terfyn, mae angen ymchwilio i ddiffygion offer neu wallau gweithredol.

Cofnodwch y data gwreiddiol (megis cromatogramau, cromliniau safonol, tablau cyfrifo cyfradd adfer) i sicrhau olrhain.

02

Datblygu Dull Arwydd Sefydlogrwydd

Ar gyfer profion diraddio gorfodol, dylai gwmpasu ocsidiad, amlygiad golau, hydrolysis, ac ati, i efelychu amodau storio gwirioneddol. Er enghraifft, liraglutide wedi'i osod ar 60 gradd am 48 awr, dylai'r gyfradd ddiraddio fod yn fwy na neu'n hafal i 10% i wirio gallu'r dull i ganfod cynhyrchion diraddio.

03

Cydymffurfiad rheoliadol

Dilynwch ICH Q2 (R2), USP<1225>, a chanllawiau GMP Tsieineaidd i sicrhau bod yr eitemau dilysu yn cwmpasu dangosyddion craidd fel penodoldeb a chywirdeb.

Ar gyfer dadansoddi amhuredd elfennol, dylai gydymffurfio ag ICH Q3D ac USP<233>gofynion, gan reoli terfynau elfennau 1 dosbarth fel AS, CD, a PB.

Tagiau poblogaidd: Powdwr Liraglutide CAS 204656-20-2, Cyflenwyr, gweithgynhyrchwyr, ffatri, cyfanwerthu, prynu, pris, swmp, ar werth