Thiazolyl Blue CAS 298-93-1

Mae Shaanxi BLOOM Tech Co, Ltd yn un o gynhyrchwyr a chyflenwyr mwyaf profiadol thiazolyl blue cas 298-93-1 yn Tsieina. Croeso i swmp cyfanwerthu o ansawdd uchel thiazolyl glas cas 298-93-1 ar werth yma gan ein ffatri. Mae gwasanaeth da a phris rhesymol ar gael.

Thiazolyl glas, sy'n fwy adnabyddus fel MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid), yn cynnal deuoliaeth hynod ddiddorol - mae'n arf hanfodol mewn bioleg celloedd ac yn rhyfeddod cemegol chameleonig. Mae'r powdr crisialog melyn hwn yn destun metamorffosis syfrdanol mewn celloedd byw: mae reductases mitocondriaidd yn hollti ei gylch tetrazolium, gan ei drawsnewid yn waddod formazan porffor anhydawdd - adwaith mor drawiadol yn weledol fel ei fod wedi dod yn safon aur ar gyfer mesur hyfywedd celloedd. Eto i gyd y tu hwnt i fainc y labordy, mae MTT yn datgelu ymddygiadau mwy esoterig; mae ei strwythur crisialog yn ffurfio patrymau "asgwrn y penwaig" rhyfedd o dan ficrosgopeg, tra bod ei briodweddau rhydocs yn caniatáu iddo gymryd rhan mewn adweithiau ffotocemegol egsotig pan fydd yn agored i donfeddi golau penodol. Yn rhyfedd iawn, mae'r cyfansoddyn yn arddangos ffenomen brin o'r enw "metachromasia" - yn ymddangos mewn lliwiau gwahanol yn dibynnu ar grynodiad ac amgylchedd moleciwlaidd - eiddo a oedd unwaith yn cael ei ddefnyddio gan gemegwyr tecstilau i greu llifynnau "clyfar". Mae astudiaethau diweddar wedi datgelu ei rôl annisgwyl fel atalydd gwan o rai ensymau cadwyn anadlol, gan awgrymu y gallai'r adweithydd assay hollbresennol hwn fod wedi dylanwadu'n gynnil ar yr union brosesau metabolaidd y mae gwyddonwyr yn eu defnyddio i astudio. Pan gaiff ei hydoddi mewn toddyddion organig, mae hydoddiannau MTT yn arddangos effaith diffodd fflworoleuedd anarferol sydd wedi drysu cemegwyr ffisegol, gan awgrymu rhyngweithiadau rhyngfoleciwlaidd cymhleth sy'n dal i aros am esboniad llawn.

Thiazolyl Glas, Yr enw cemegol yw 3- (4,5-dimethyl-2-thiazole) -2,5-diphenyltetrazolium bromid, wedi'i dalfyrru fel MTT, sy'n gyfansoddyn organig pwysig. Ers i Mosman adrodd am y defnydd o staen MTT i bennu twf celloedd a goroesiad ym 1983, mae MTT wedi'i gymhwyso'n eang mewn meysydd fel gwyddorau bywyd, ymchwil feddygol, a datblygu cyffuriau. Mae'r canlynol yn esboniad manwl o'i ddiben:

Cymhwysiad mewn Ymchwil Bioleg Celloedd

 

MTT yw un o'r dulliau clasurol ar gyfer pennu amlhau celloedd. Yn ystod meithriniad celloedd, gall dehydrogenases fel succinate dehydrogenase mewn mitocondria celloedd byw leihau MTT alldarddol i formazan crisialog porffor glas anhydawdd, sy'n dyddodi yn y gell. Nid oes gan gelloedd marw y gallu lleihau hwn ac felly nid ydynt yn cynhyrchu formazan. Trwy hydoddi formazan mewn celloedd a mesur ei werth amsugniad golau ar donfeddi penodol (fel 490nm neu 562nm) gan ddefnyddio darllenydd -profiad imiwnosorbent cysylltiedig (ELISA) ensym, gellir adlewyrchu nifer y celloedd byw yn anuniongyrchol. O fewn ystod benodol o rifau celloedd, mae swm y crisialau MTT a ffurfiwyd yn gymesur â nifer y celloedd, felly gellir pennu amlder celloedd yn seiliedig ar y gwerth amsugno mesuredig (gwerth OD).

Cymhwysiad mewn Ymchwil Bioleg Celloedd

 

Gellir defnyddio MTT hefyd i bennu gwenwyndra cyffuriau neu ddulliau trin eraill (fel arbelydru ymbelydredd) ar gelloedd diwylliedig in vitro. Trwy gymharu gwerthoedd OD y grŵp triniaeth a'r grŵp rheoli, gellir gwerthuso effaith cyffuriau neu ddulliau triniaeth ar weithgaredd celloedd. Po fwyaf yw'r gwerth OD, y cryfaf yw gweithgaredd y gell; I'r gwrthwyneb, mae'n nodi mai'r gwannaf yw gweithgaredd y gell neu'r mwyaf yw gwenwyndra'r gell. Mae gan y dull hwn gymwysiadau eang mewn sgrinio cyffuriau, ymchwil tocsicoleg, a meysydd eraill. Er bod MTT yn cael ei ddefnyddio'n bennaf i fesur amlder celloedd a sytotocsigedd, mewn rhai achosion, gellir ei ddefnyddio hefyd i gynorthwyo i astudio apoptosis celloedd. Yn ystod y broses o apoptosis celloedd, mae gweithgaredd yr ensymau y tu mewn i'r gell yn newid, a all effeithio ar allu lleihau MTT. Trwy gymharu'r gwahaniaeth mewn gwerthoedd OD rhwng celloedd apoptotig a chelloedd arferol, gellir pennu digwyddiad apoptosis celloedd yn rhagarweiniol. Fodd bynnag, dylid nodi nad yw MTT yn ddull arbenigol ar gyfer canfod apoptosis celloedd, ac mae angen dadansoddi ei ganlyniadau'n gynhwysfawr ar y cyd â dulliau canfod apoptosis eraill.

Cymhwyso wrth ddatblygu cyffuriau

 

Yn y broses o ddatblygu cyffuriau, mae assay MTT yn ddull sgrinio cyffuriau trwybwn uchel a ddefnyddir yn gyffredin. Trwy gyd deor y cyffur prawf â chelloedd a defnyddio assay MTT i fesur newidiadau mewn gweithgaredd celloedd, gellir sgrinio moleciwlau cyffuriau gweithredol posibl yn gyflym. Mae gan y dull hwn fanteision gweithrediad hawdd, canlyniadau dibynadwy, a thrwybwn uchel, ac mae ganddo werth cymhwysiad pwysig yng nghyfnod cynnar datblygu cyffuriau. Gellir defnyddio'r assay MTT hefyd i astudio mecanwaith gweithredu cyffuriau. Trwy gymharu'r newidiadau mewn gweithgaredd celloedd o dan amodau trin cyffuriau gwahanol, gellir pennu effaith cyffuriau ar brosesau megis amlhau celloedd ac apoptosis yn rhagarweiniol. Trwy gyfuno technegau bioleg moleciwlaidd eraill megis echdor y Gorllewin a sytometreg llif, gellir datgelu targedau a llwybrau signalau cyffuriau ymhellach. Wrth werthuso diogelwch cyffuriau, gellir defnyddio assay MTT i asesu effeithiau gwenwynig cyffuriau ar gelloedd. Trwy fesur y newidiadau gwerth OD o gelloedd ar ôl triniaeth gyffuriau, mae'n bosibl penderfynu a oes gan y cyffur sytotocsigedd a chryfder gwenwyndra. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer arwain ymchwil cyn-glinigol a chymhwyso cyffuriau yn glinigol.

Cymhwyso MTT mewn meysydd eraill

 

Mewn ymchwil imiwnolegol, gellir defnyddio assay MTT i bennu gallu lluosogi lymffocytau. Trwy gyd deor lymffocytau ag antigenau neu imiwnostimulants a mesur newidiadau mewn gweithgaredd celloedd gan ddefnyddio assay MTT, gellir gwerthuso gallu ymateb imiwn lymffocytau. Mae gan y dull hwn gymwysiadau eang mewn datblygu brechlynnau, imiwnotherapi, a meysydd eraill. Mewn ymchwil oncoleg, gellir defnyddio assay MTT i bennu gweithgaredd amlhau a sensitifrwydd cyffuriau celloedd tiwmor. Trwy gymharu'r newidiadau yng ngwerthoedd OD celloedd tiwmor o dan amodau trin cyffuriau gwahanol, gellir sgrinio moleciwlau cyffuriau ag effeithiau ataliol ar gelloedd tiwmor a gellir gwerthuso eu heffeithiau gwrth-diwmor. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer llywio triniaeth glinigol tiwmorau. Mewn ymchwil tocsicoleg amgylcheddol, gellir defnyddio assay MTT i werthuso effeithiau gwenwynig llygryddion amgylcheddol ar gelloedd. Trwy gyd deor celloedd â chrynodiadau gwahanol o lygryddion a mesur newidiadau mewn gweithgaredd celloedd gan ddefnyddio assay MTT, gellir pennu gwenwyndra a mecanwaith gweithredu llygryddion. Mae hyn yn arwyddocaol iawn ar gyfer asesu risgiau ecolegol llygryddion amgylcheddol a llunio polisïau diogelu'r amgylchedd. 

Camau arbrofol oglas thiasolyldull:

1: Mae Trypsin yn treulio celloedd cyfnod logarithmig, yn allgyrchu ac yn eu casglu ar ôl terfynu i wneud ataliad celloedd, ac yn addasu ei grynodiad i 5-10 yn ôl cyfrif celloedd × 104/ml. Ar gyfer dechreuwyr, mae angen gwneud celloedd yn cyrraedd 5-10 × 104 / ml yn aml ddim yn gwybod ble i ddechrau. Rwyf yma i roi dull syml i chi i bennu nifer y celloedd i ddechrau.

Cymerwch 25cm2 a ddefnyddir yn gyffredin ar gyfer meithriniad celloedd fel enghraifft:

1) Mae dwysedd y gell tua 80% ~ 90% (mae'r ffigur isod yn dangos cyflwr bras y celloedd ar ddwysedd 80% ~ 90%). Ar ôl treulio a centrifugation, tynnwch y supernatant, ac ychwanegu cyfrwng 3ml i'w gymysgu.

2) Cymerwch diwb centrifuge di-haint 15ml newydd (ar gyfer y cam nesaf o frechu plât 96-ffynnon) a'i lenwi â chyfrwng tua 9ml

3) Cymerwch 1ml o'r ataliad cell 3ml a baratowyd yn y cam cyntaf, ei ychwanegu i'r tiwb uchaf, a chyfrwch y celloedd ar ôl cymysgu. Ar yr adeg hon, yn gyffredinol mae'n 5-10 neu lai × 104/ml, sy'n cyfateb i 5-10 celloedd fesul cell mewn 4 cell o'r bwrdd cyfrif celloedd (gweler y ffigur isod); Os nad yw'r crynodiad yn ddigon, rhaid ychwanegu'r ataliad cell yn ôl y canlyniad cyfrif, a rhaid cyfrifo pob diferyn fel 50ul.

4) Dylid addasu nifer y celloedd yn ôl gwahanol ddibenion yr arbrawf. Er enghraifft, mewn arbrawf amlhau celloedd cyffredinol, gellir defnyddio 2000 o gelloedd fesul ffynnon (sy'n cyfateb i ddwysedd ataliad celloedd o 2 × 104/ml), 5000 i 10000 o gelloedd fesul ffynnon (sy'n cyfateb i ddwysedd ataliad celloedd o 5 × 104/ml). Yn ogystal, dylid pennu nifer y celloedd hefyd yn ôl eu nodweddion eu hunain, megis cyflymder twf. Er enghraifft, gall dwysedd celloedd sy'n tyfu'n gyflymach fod ychydig yn llai.

2. Ar ôl paratoi'r ataliad cell, cymysgwch ef yn ysgafn ac ychwanegwch 100ul i bob twll, fel bod dwysedd y celloedd i'w profi yn 5000-10000/twll (mae'r twll ymyl wedi'i lenwi â PBS di-haint).

L Nodyn: Oherwydd bydd y celloedd yn parhau i setlo ar ôl cymysgu, mae angen cymysgu dro ar ôl tro yn ystod y broses o frechu, megis cymysgu unwaith bob chwe thwll, i sicrhau bod dwysedd celloedd y brechiad yn union yr un fath rhwng y tyllau, sy'n hanfodol i ganlyniadau MTT.

3. Rhowch y plât meithrin celloedd wedi'i frechu yn y deorydd i'w drin nes bod y monolayer cell wedi'i orchuddio â gwaelod y twll (plât fflat 96-twll), ac ychwanegwch y cyffur â graddiant crynodiad. Mewn egwyddor, gellir ychwanegu'r cyffur ar ôl i'r gell gael ei gysylltu â'r wal, neu ddwy awr, neu hanner diwrnod, ond rydym yn aml yn ychwanegu'r cyffur yn y prynhawn y diwrnod blaenorol, a'r bore wedyn. Yn gyffredinol, gosodir 5-7 graddiant, 100ul y twll, a 3-5 tyllau lluosog. Argymhellir gosod 6, fel arall mae'n anodd adlewyrchu'r sefyllfa wirioneddol. Gellir defnyddio'r ffigur canlynol fel cam cyfeirio ar gyfer plât 96-twll.

L Ar gyfer dosio, mae rhai pobl yn ychwanegu cyffuriau'n uniongyrchol i blatiau 96-ffynnon o wahanol gyfeintiau i ffurfio graddiant crynodiad. Ond rwy'n credu y dylem geisio cymysgu gwahanol grynodiadau o gyffuriau yn y tiwb EP, yna tynnwch y supernatant diwylliant o'r plât 96-ffynnon (y gellir ei sugno i ffwrdd â gwn rhyddhau) ac ychwanegu 100ul o gyfrwng diwylliant sy'n cynnwys crynodiadau gwahanol o gyffuriau, a all sicrhau cywirdeb crynodiad cyffuriau. Yn ogystal, dylid nodi, os defnyddir y dull hwn, peidiwch â sugno'r holl ateb diwylliant plât 96-ffynnon cyn ychwanegu meddyginiaeth. Dylech ychwanegu samplau yn syth ar ôl sugno rhan ohono i osgoi marwolaeth celloedd oherwydd sychu'r plât 96-ffynnon.

Deorwch â 4.5% CO2 ar 37 gradd am 16-48 awr, ac arsylwi effaith y cyffur o dan y microsgop gwrthdro. Mae'r ffigur canlynol yn dangos graddiant cyffuriau nodweddiadol o sytowenwyndra.

4. Ychwanegu hydoddiant MTT 10ul (5mg/ml, hy. 0.5% MTT) at bob ffynnon a pharhau i feithrin am 4 awr. Os gall y cyffur ymatebglas thiasolylgellir taflu'r hydoddiant diwylliant ar ôl centrifugio, a gellir ychwanegu'r toddiant diwylliant sy'n cynnwys MTT ar ôl ei olchi gyda PBS am 2-3 gwaith.

5. Rhoi'r gorau i'r diwylliant a pharatoi ar gyfer diddymu a chrisialu.

Thiazolyl Glas, y mae ei enw Tsieineaidd yn Methyl Blue, yn gyfansoddyn organig pwysig a ddefnyddir yn eang mewn meddygaeth, bioleg a chemeg. mewn meddygaeth, fe'i defnyddir yn aml i drin gwenwyn nitraid, gwenwyn cyanid, ac ati, ac fe'i defnyddir hefyd wrth ddiagnosio a thrin rhai afiechydon; Mewn ymchwil fiolegol, gellir ei ddefnyddio fel asiant staenio ar gyfer labelu celloedd neu feinweoedd. Fodd bynnag, fel llawer o gyffuriau, gall methylene glas hefyd gael cyfres o sgîl-effeithiau yn ystod y defnydd:

Sgîl-effeithiau system dreulio

Cyfog a chwydu yw un o sgîl-effeithiau system dreulio cyffredin glas methylene. Pan fydd glas methylene yn mynd i mewn i'r corff, gall ysgogi'r mwcosa gastroberfeddol, gan achosi cyfog a hyd yn oed chwydu mewn achosion difrifol. Mae'r symptom hwn yn fwy amlwg pan fydd cyflymder y pigiad mewnwythiennol yn rhy gyflym neu pan fo'r dos yn rhy fawr. Er enghraifft, mewn rhai achosion clinigol, gall cleifion brofi cyfog a chwydu sylweddol yn fuan ar ôl pigiad mewnwythiennol cyflym o methylene glas, sy'n effeithio ar eu cysur a'u profiad o driniaeth. Gall rhai cleifion brofi poen yn yr abdomen ar ôl defnyddio methylene glas, a gall graddau'r boen amrywio yn dibynnu ar wahaniaethau unigol, yn amrywio o anghysur ysgafn i boen mwy difrifol.

Ar yr un pryd, gall hefyd fod yng nghwmni dolur rhydd, a all fod oherwydd ymyrraeth methylene glas ar peristalsis berfeddol a swyddogaeth dreulio, gan arwain at symudiad annormal berfeddol a newidiadau mewn hylif treulio secretion.Long digwyddiad tymor neu aml o boen yn yr abdomen a dolur rhydd nid yn unig yn effeithio ar amsugno maetholion y claf ac iechyd corfforol, ond gall hefyd arwain at gymhlethdodau eraill.

Sgîl-effeithiau'r system wrinol

Ar ôl defnyddio methylene glas, bydd y lliw wrin yn troi'n las, sy'n cael ei achosi gan ysgarthu methylene glas a'i metabolion i'r wrin trwy'r arennau. Yn gyffredinol, mae'r newid hwn mewn lliw wrin yn newid dros dro ac ni fydd yn cael effaith ddifrifol ar iechyd corfforol. Ond mewn rhai achosion arbennig, megis cleifion â chlefydau'r system wrinol, gall newidiadau mewn lliw wrin ymyrryd â diagnosis y clefyd, ac mae angen i feddygon gynnal dadansoddiad cynhwysfawr yn seiliedig ar ddangosyddion arholiad eraill. Yn ystod troethi, gall rhai cleifion deimlo teimlad o bigiad yn yr agoriad wrethrol.

 

Gall hyn fod oherwydd effaith ysgogol methylene glas ar y mwcosa wrethrol, yn enwedig pan fo'r crynodiad wrin yn uchel neu pan fydd y mwcosa wrethrol yn cael ei rwbio yn ystod troethi, bydd y teimlad pigo yn fwy amlwg. Gall y symptom hwn achosi anghysur penodol i gleifion ac effeithio ar eu bywyd bob dydd.

Sgîl-effeithiau niwrolegol

Mae pendro a chur pen yn sgîl-effeithiau niwrolegol cyffredin methylene glas. Ar ôl defnyddio methylene glas, efallai y bydd cleifion yn teimlo'n benysgafn ac yn ddryslyd yn y pen, neu'n profi anghysur fel chwyddo a phoen yn y pen. Gall y symptom hwn effeithio ar allu sylw a meddwl y claf, a lleihau effeithlonrwydd gwaith a bywyd. Gall pendro a chur pen fod yn gysylltiedig ag effeithiau glas methylene ar bibellau gwaed a nerfau'r ymennydd, ac mae angen ymchwil pellach o hyd i'r mecanwaith penodol. Mewn achosion prin, gall methylene glas achosi anhwylderau ymwybyddiaeth fel syrthni, coma, ac ati.

Mae hyn fel arfer oherwydd defnydd gormodol o methylene glas neu gleifion yn rhy sensitif i'r cyffur, gan achosi ataliad difrifol o'r system nerfol ganolog. Mae anhwylderau ymwybyddiaeth yn sgîl-effaith ddifrifol a all beryglu diogelwch bywyd y claf ac sydd angen triniaeth achub ar unwaith.

1.Beth yw'r defnydd o thiazolyl glas tetrazolium bromid?

Gellir defnyddio Thiazolyl Blue Tetrazolium Blue (MTT) i fesur amlder celloedd. Mae MTT yn cynhyrchu hydoddiant melynaidd sy'n cael ei drawsnewid yn fformazan MTT glas tywyll, anhydawdd gan ddŵr gan ddadhydrogenasau mitocondriaidd celloedd byw.

2.A yw Thiazolyl Blue yn ddiogel i'w storio?

Amodau Tymheredd: Seliwch y powdr a'i storio mewn oergell ar - 20 gradd ar gyfer cadw rhewi, a all ymestyn yr oes silff yn effeithiol (1-2 flynedd fel arfer); ar gyfer storio tymor byr (o fewn 1 mis), gellir ei gadw dros dro o dan amodau rheweiddio 4 gradd.

Gwrthsefyll golau a Lleithder Gofynion: Mae powdr MTT yn sensitif i olau a rhaid ei storio mewn poteli adweithydd brown neu boteli tryloyw wedi'u lapio â ffoil tun. Yn y cyfamser, dylid ychwanegu asiantau sychu (ee, gel silica) i atal y powdr rhag amsugno lleithder a chacen.

3.Will Thiazolyl Blue newid lliw?

Pan fydd yr hydoddiant yn dangos gwaddod porffor glas neu'n tywyllu mewn lliw, mae'n nodi ei fod wedi'i ocsidio ac na ellir parhau i'w ddefnyddio.
Ceisiwch osgoi gosod yr hydoddiant ar dymheredd ystafell neu mewn amgylchedd ysgafn, oherwydd gallai fethu'n gyflym.

Tagiau poblogaidd: thiazolyl glas cas 298-93-1, cyflenwyr, gweithgynhyrchwyr, ffatri, cyfanwerthu, prynu, pris, swmp, ar werth